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創新基因診斷實驗室
分子生物科技
5D DNA
严谨、创新、探索,始终专注于基因测序技术向应用转化
使用验血查性别可以用到很多dna基因检测项目中,对一些病例分析提供了很大的帮助,在香港验血查性别不单单是为了可以知道bb性别,同时这种方法也是用于诊断是否胎儿患有染色体异常的情况,在验血查性别知道寶寶性别后对于孕母有染色体疾病的患者有很大帮助,因为很多孕妇的身体原因是不可以怀男宝宝的。下面我们将对病例进行分析来技术对结果的重要性,同时也可以对查性别进行深入分析。
病例 1,一名 29 岁女性,妊娠 2,第 2 段,被转诊到我们的诊所,因为她计划在妊娠 9 周时获得 DMD 的产前诊断。因为她的第一个儿子患有 DMD,她接受了基因检测并被诊断为 DMD 携带者(图 2a;受试者 II-1 和 I-1)。在之前的怀孕期间,在妊娠 12 周进行 CVS 用于 DMD 的产前诊断,遗传分析得出胎儿是男性并且没有 DMD 突变的结论(图 2a;受试者 II-2)。
杜氏肌营养不良症怀孕携带者的谱系。( a ) 案例 1;( b ) 案例 2;( c ) 病例3。ETC表示异位妊娠。箭头表示情况。实心方块表示患有杜氏肌营养不良症的男性;实心内圈表示女性携带者。P 表示当前怀孕。
病例 2,一名 23 岁女性,妊娠 3,第 1 段,在妊娠 7 周时被转诊到我们的诊所。因为她的第一个儿子患有 DMD,她接受了基因检测并被诊断为 DMD 携带者(图 2b;受试者 II-1 和 I-1)。
病例 3,一名 29 岁女性,妊娠 3,第 1 段,在妊娠 9 周时被转诊到我们的诊所。因为她的弟弟患有 DMD,她接受了基因检测,并被诊断为 DMD 携带者,这是由DMD基因中的外显子 47 缺失引起的(图 2c;受试者 II-4 和 II-2)。她的第一次和第三次怀孕是在妊娠早期的人工终止(图 2c;受试者 III-1 和 III-3)。她的第一个儿子被诊断出患有 DMD,这是由外显子 47 缺失引起的(图 2c;受试者 III-2)。
采集和提取母体血浆中的 cff-DNA
从妊娠 9 到 12 周采集系列 EDTA 血样(7 毫升)。还从 50 名怀有男性胎儿的女性和 50 名怀有女性胎儿的女性身上采集了 EDTA 血液样本。将血样以 3000 g离心两次以获得真正的无细胞血浆。如前所述,使用 QIAamp 血液微型试剂盒(Qiagen,Hilden,Germany)从 1.6 ml 母体血浆中提取无细胞 DNA。9 DNA 被洗脱到 30 μl 无菌和无 DNase 的水中。
使用 cff-DNA 的巢式 PCR 确定性别
使用多重嵌套 PCR 进行性别确定,以扩增 X 特异性FMR1基因和 Y 特异性SRY基因。PCR 引物和条件之前已经描述过。12 FMR1特异性序列和SRY特异性序列首先通过两组PCR引物对FMR1.1(5'-CCCTGATGAAGAACTTGTATCTC-3')、FMR1.2(5'-GAAATTACACACATAGGTGGCACT-3')共扩增, SRY1 (5'-CTAGACCGCAGAGGCGCCCAT-3') 和 SRY2 (5'-TAGTACCCACGCCTGCTCCGG-3')。PCR 反应在 20 μl 混合物中进行,该混合物含有 5 μl cff-DNA,每种引物 10 p M,250 MdNTP、0.5 U Ampli Taq Gold DNA 聚合酶(Applied Biosystems,Foster City,CA,USA)和 2 μl 10 × PCR 缓冲液(Applied Biosystems),使用 GeneAmp PCR System 9700(Applied Biosystems)。使用引物 FMR1.3 (5'-TCGCCTTTCTCAAATTCCAAG-3')、FMR1.2、SRY3 (5'-CATCCAGAGCGTCCCTGGCTT-3') 和 SRY4 (5'-CTTTCCACAGCCACATTTGTC-3') 进行巢式 PCR,总体积为20 μl 使用 1 μl 第一个 PCR 产物作为模板。第一次和嵌套 PCR 在 95°C 10 秒、55°C 30 秒和 72°C 30 秒下循环 40 次。在 2.0% 琼脂糖凝胶上分析 10 μl 的巢式 PCR 产物。cff-DNA 的 PCR 产物只有来自 X 染色体的 261-bp 片段——胎儿是女性——而那些同时具有来自 X 染色体的 261-bp 和来自 Y 染色体的 198-bp 片段,因此胎儿是男性.
检测费用:2800 - 4000 人民币/港币
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